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    葉綠素儀有關葉綠素a的測定過程概述
    點擊次數:137 發布時間:2022-05-17
       葉綠素儀是通過兩種光來檢測葉綠素含量的,在兩個不同波長區域,葉綠素對光吸收是不相同的,在這兩個不同波長區域下,根據光通過葉片傳輸數量的不同進行葉綠素相對含量的計算。兩個LED光源發射兩種光,一種是紅光,一種是紅外線,兩種光穿透葉片,打到接收器上,光信號轉換成模擬信號,模擬信號被放大器放大,由模擬/數字轉換器轉換成數字信號,數字信號被微處理器處理,計算出葉綠素值并顯示。
      有關葉綠素a的測定過程可能要用到分光光度計、天平、研缽、棕色容量瓶、小漏斗、定量濾紙、吸水紙、擦境紙、滴管等儀器。準備幾片新鮮的植物葉片,準備96%的乙醇、石英砂和碳酸鈣粉,具體操作步驟如下:
      取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或干材料,擦凈組織表面污物,去除中脈剪碎。稱取剪碎的新鮮樣品2g,放入研缽中,加少量石英砂和碳酸鈣粉及3mL95%乙醇,研成均漿,再加乙醇10mL,繼續研磨至組織變白。靜置3-5min。取濾紙1張置于漏斗中,用乙醇濕潤,沿玻棒把提取液倒入漏斗,濾液流至100mL棕色容量瓶中;用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數次,后連同殘渣一起倒入漏斗中。用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。后用乙醇定容至100mL,搖勻。取葉綠體色素提取液在波長665nm、645nm和652nm下測定吸光度,以95%乙醇為空白對照。
      然后根據資料上提供的葉綠素a的計算方法,就可算出新鮮的植物葉片葉綠素a的含量。具體公式如下:
      葉綠素a=(12.7A665-2.69A645)·(V/1000W);
      葉綠素b=(12.7A645-2.69A665)·(V/1000W);
      總葉綠素a=(20.0A645+8.02A665)·(V/1000W)或總葉綠素a=(A652/34.5)·(V/1000W)。
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